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细胞在外面放了3小时 |
冻存细胞时在常温放了2小时,细胞什么时候冻存最好
复苏细胞的方法应快速解冻,这样可以保证细胞外晶体在短时间内熔化,避免因缓慢解冻导致水分渗入细胞内形成细胞内重结晶而对细胞造成损伤。 1.慢速冷冻→2.为了保证细胞的存活,冻存的冷却过程必须是渐进的。我们通常采用渐进冷却的方法,即:4℃→-20℃→-70℃→-196℃(液氮)。 一般在4℃下放置30分钟,然后转至零下20℃。放置2小时后,转至零下70℃。零下70℃即可。
岳道文2012:之前加DMSO后,我没有立即放掉,我检查了花园,发现室温下的DMSO对细胞有很大的伤害。 唉,今天冻存细胞的时候,我把温度放在-20℃,本来应该只保存2-3小时,结果忘了,晚上才记得一共保存了9个小时:(然后我把温度放在-70℃,我想知道细胞是不是死了,有专家能给点建议吗?
BiyunAida说:2021-08-2714:45:11将细胞冷冻保存管放置在程序冷冻箱等可以逐渐降低温度的装置中,然后放置在80°C的冰箱中,以确保冷却速度约为1℃/min。 一般情况下降温速度不要超过0.5℃/分钟,对我没有影响。我在室温下放置了一个小时左右,还能正常恢复。2022-08-16来自iOSIP北京北京收藏回复点赞RB16B:
其次,你已经将其放入冷冻箱中,但你只是忘记将其放入-80°C冰箱中。理论上,3小时效果不大;最后,你可以尝试复活并尽可能转移到-80°C,然后你可以弹动冷冻保存管。 避免细胞沉淀。细胞在冻存液中重悬后,应尽可能在程序冷却箱中冷冻至80°C。时间过长会降低细胞活性。此外,长时间的室温可能会导致细胞沉淀,从而造成严重的损伤。
冻存细胞一般选择细胞汇合度在90%左右时,细胞生长状况良好且细胞数量较多,收获细胞前24小时更换培养基。 细胞冻存的初始方法与通常相同。离心100xg。在冻存过程中,如果细胞在-20°C下放置时间过长,它们可能会恢复,但存活率很低。 |给予。 也许我只是觉得细胞活力会受到影响|||可能和你冷冻的细胞类型有关,有些可以
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标签: 细胞什么时候冻存最好
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