cck8孵育时间超过4小时,cck8和培养基比例

cck8孵育时间超过4小时,cck8和培养基比例

≥﹏≤ 我打算检查一下情况。现在我有一些疑问。我想请专家帮忙。非常感谢。 我使用三气培养箱并将缺氧条件设置为1%氧气。 1.假设我探索的缺氧条件是3小时。时间到后，我加入cck8并孵育ck82-4小时。每孔加入10ulCCK-8溶液。 如果初始培养体积为200ul，则需要添加20ul的CCK-8溶液，其他情况则很快。 5.继续在细胞培养箱中孵育0.5至4小时。大多数情况下，1小时就足够了。 时间长短取决于细节

cck8实验步骤：1.细胞接种板：用胰蛋白酶消化对数生长期的细胞，并制备细胞悬液。每孔加入100μl，达到每孔1000-5000个细胞的细胞密度。用无菌PBS填充边缘孔。 。 37°C下5%CO2培养，直至细胞完全融合。每孔中加入10μLCCK溶液（注意不要在孔中产生气泡，因为它们会影响OD值的读数）。 将培养板在培养箱中孵育1-4小时。 使用酶标仪测量450nm处的吸光度。 如果暂时不测OD值，可以添加

3.细胞培养一段时间后，加入CCK8试剂，孵育1-4小时。 4.使用酶标仪测量，以细胞数为X轴，OD值为Y轴，绘制标准曲线。 添加CCK8后的最佳检测时间：1.CCK8试剂与细胞内脱氢酶4、cck8试剂添加量；5.添加cck8试剂后的细胞孵育时间。 看起来很多，但实际上这是一个实验。 且均为空白平板进行播种，即不添加药物，仅添加细胞和CCK8。1.播种板数量：此要求

∩▂∩ 1、CCK-8的培养时间一般为1-4小时，但培养30分钟左右即可肉眼观察显色程度，具体取决于细胞类型和需要探索的条件。CCK-8的最佳反应时间取决于具体的显色情况。 以最佳着色时间为准。 2.使用96孔板检测时，如果细胞培养物的吸光度很小，可以直接添加CCK-8。如果吸光度较大，则需要除去培养基，用培养基洗涤细胞两次，然后添加新的100μl培养基和10μl的CCK-8用于检测。 37°C孵育1-4小时。 怀特细恩

一般来说，白细胞更难发育，需要更长的CCK-8反应时间或增加的细胞数量（~105个细胞/孔）。 悬浮细胞比贴壁细胞更难发育。 对于悬浮细胞，如果添加CCK-8孵育后仍不确定，可以适当延长孵育时间，建议不要超过4小时。 您还必须注意对照组和零孔，否则数据