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Trizol提取RNA的作用 |
trizol法提取rna,trizol毒性有多大
RNA提取详细步骤:1.离心机空转15分钟,预冷至4°C。 2.取出RNA特异性氯仿、异丙醇、75%乙醇、RNA游离水、1.5mlEP管和两管样品(Trizol刚刚经过rozenin-2处理后。Trizol可以保持样品中RNA的完整性,即可以有效抑制RNA的降解;♦提取Trizol每百万个细胞可获得5-15μgRNA;1-1每毫克组织提取Trizol可获得0μgRNA。产量因细胞和组织而异;
指尖、移液器吸头、水/缓冲液、实验台、内源性RNA酶、RNA样品、质粒提取、RNA保存、阳离子(Ca、Mg)、后续实验中使用的酶。 操作流程:1.样品处理:(1)培养细胞:收获细胞1-5×107个,Trizol法提取RNA。实验步骤所需试剂:氯仿异丙醇75%乙醇(DEPC处理水)RNasefree水或0.5%SDS溶液1.组织匀浆(1)取出高温高压灭菌研钵,切取50-100mg冷冻组织
TrizolRNA提取方法因其操作简单、回收率高、提取的RNA质量高等优点,已成为常用的RNA提取方法。 1原理Trizol试剂的主要成分是异硫氰酸胍和苯酚。异硫氰酸胍可以裂解细胞并促进核糖体。如果TRNzol试剂用量不足,提取的RNA可能会出现DNA污染。 2)胰蛋白酶处理法:测定细胞数,吸出培养液,用PBS洗涤细胞,吸出PBS,向细胞中加入0.1-0.25%胰蛋白酶。
●▂● RNA提取方法(TRIzol法)1.试剂准备1.TROzlo试剂,氯仿,75%乙醇(用0.1%DEPC配制)。 2.塑料餐具需用0.1%DEPC水浸泡。 3.0.1%DEPC水:将0.1mlDEPC加入100mldd水中,充分摇匀TRIzol法提取RNATRIzol法提取RNA总RNA提取(TRIzol法)仪器和材料:氯仿、异丙醇、无水乙醇、RNase-free移液器吸头(1000μL、200μL、10μL)、移液器、RNase-freeEP管(1.5毫升,2毫升,15毫升,
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