细胞冻存液的配制9比1,细胞换液培养基要预热吗

细胞冻存液的配制9比1,细胞换液培养基要预热吗

Step1：配制程序冻存液，室温保存备用或4℃预冷。Step2：离心收集对数生长期细胞（贴壁细胞消化离心，悬浮细胞直接1200rpm或250g离心，时间3min）Step1.DMEM冻存液配方-甘油：10%-FBS：90%。将甘油和FBS混合均匀，配制冻存液。将细胞和冻存液混合均匀，分装到储存容器中。 冷冻储存。 2.RPMI1640冷冻保存液配方-甘油：10%-

3.DMSO:含10%FBS的DMEM=1:9(体积比)。 DMSO在冷冻液中的作用：DMSO在4℃下对细胞无明显毒性，分子量小，溶解度高，不易穿透细胞膜，降低未冷冻细胞外液中溶质的浓度，保护细胞免受高浓度细胞计数。 最后将细胞重悬于配制好的细胞冷冻液中至5×10^6~1×10^7个细胞/mL，然后等分并冷冻在1~1.5mL/管中。 对于存活率低的细胞系或需要长期保存的细胞系，

对于存活率较低的细胞系，或需要长期保存的细胞系，可以提高冻存液中的血清浓度。血清与DMSO的配制比例为9:1。 计数完毕后，将细胞重悬于配制好的细胞冻存液中至5×10^6~1×10^7ce（1）准备：等分胰蛋白酶（一般不需要自己配制，成品有）+PBS+冻存培养基（培养液：血清：DMSO=5:4:1，血清含量也可以高一些，直接9:1即可不能，但血清较贵，但不常用于冷冻保存 )+冷冻储存管+离心管+培养皿(

3.细胞冻存液的配制：在50ml离心管中加入FBS：8ml；DMSO：3ml；培养基：29ml，混匀。 使用细胞冻存液冷冻细胞的方法(1)冻存前一天更换培养基。 2）吸出培养细胞并计数，然后将细胞重悬于配制好的细胞冷冻液中至5×10^6~1×10^7细胞/mL，然后分装1~1.5mL/管冷冻保存。 对于存活率低的细胞系或需要长期保存的细胞系，您可以

不同浓度有不同的适用性。 从查询行业网了解到。 1.7:2:1冷冻液中DMSO的浓度较高，而9:1冷冻液中DMSO的浓度较低。 2.7:2:1冷冻液适用于细胞容易存活的情况。9:1冷冻液含有10%-15%（一般为10%）DMSO有机甘油和10%-20%血清。 培养液。 一般来说，血清含量可在10%~90%之间调整。