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proteinase K |
提取过程没加蛋白酶K,蛋白酶k保存条件
采集血样时,我先在37度水浴中加入消化液1小时,然后加入蛋白酶K,消化6-7小时。因为当时血样采集确实比较困难,所以我推荐了师兄的方法。事实证明,这个方法好! 不知能否帮上忙。蛋白酶K核酸提取实验的工作浓度约为50-200μg/mL。一般情况下,从样品中提取核酸需要100μg左右的蛋白酶K。实际使用中,为了提高核酸提取效率,添加了蛋白酶K来制作
大多数提取试剂的上样量在200μL左右,不建议擅自增加。过多的样品量会带来两个后果:一是导致裂解液被稀释,降低裂解效果;二是提取过程中会出现液体溢出。 孔板,存在交叉污染的风险。 4.确保试剂中添加了蛋白酶KSDS-蛋白酶K-苯酚提取方法。提取DNA的一般过程是在含有SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液中消化和分解蛋白质。 然后用苯酚和氯仿/异戊醇提取分离蛋白质,得到DNA溶液
在DNA提取实验中,蛋白酶K可以帮助去除DNA样本中的蛋白质污染,从而纯化DNA。 实验原理如下:1、首先用蛋白酶K处理含有DNA的样品。 蛋白酶K可以识别并降解蛋白质,但不会减少100至200ug/ml的蛋白酶K。②蛋白酶K最好用水配制为20mg/ml,使用前加入消化液中。2.有些标本的提取方法,使用蛋白酶K消化前需要进行一些预处理,如粪便、分泌物、痰液、组织块、石蜡包等。
nah破坏核酸碱基配对,破坏氢键。细菌染色体DNA和质粒DNA变性。加入乙酸钾后,质粒DNA迅速复性成可溶性质粒DNA。小分子RNA也可以呈不溶状态,使染色体DNA、大分子RNA和SDS蛋白变性。 (2)在复杂样品的核酸提取过程中,很可能残留较多的RNase,使用蛋白酶K可以最大限度地灭活RNase,防止病毒RNA的降解,有利于核酸检测。 还有一些研究表明,蛋白酶K在复杂样品的处理中不起重要作用。
(ˉ▽ˉ;) 蛋白酶K是一种从白色念珠菌中分离出来的强效蛋白溶解酶。它具有高比活性,在较宽的pH范围(4~12.5)和高温(50~70°C)下不活跃。 螯合剂如EDTA或洗涤剂如SDS都是百度测试题。在DNA提取过程中,添加蛋白酶KistoA的作用。水解RNAB。降解与DNAC结合的核蛋白。螯合Ca2+和Mg²+D。沉淀DNA。相关知识点:测试题来源:分析B反馈收集
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标签: 蛋白酶k保存条件
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