hela细胞冻存细胞数,冻存细胞数量有要求吗

hela细胞冻存细胞数,冻存细胞数量有要求吗

配制细胞冻存悬液（DMSO后浓度为5~10%），使细胞浓度为1~5×106细胞/ml，混匀，分装于标记的冻存管中，1~2ml/瓶，取少量细胞悬液用于污染检测。 已知该细胞系含有人类乳头瘤病毒18序列，需要在2级生物安全遏制站中进行操作。 HeLa细胞角蛋白阳性，p53表达较低，但Prb（视网膜母细胞瘤抑制因子）表达正常水平。 生物安全2级细胞规格1×106细胞/T25

细胞特征1)来源：宫颈腺癌2)形状：上皮细胞样，贴壁生长3)含量：1x106细胞数4)规格：T25瓶或1mL冷冻保存管包装5)用途：仅供科学研究使用。 2.培养介质和培养液冷冻保存条件。细胞冷冻保存：当细胞生长状况良好时，可以对细胞进行冷冻保存。 以下面的T25瓶为例；1.冷冻细胞时，弃去培养基，用PBS清洗瓶底1-2次，然后加入1ml胰蛋白酶。待细胞变圆脱落后，加入2ml即可完全培养。

●０● 2.吸出大部分培养液，留下10-12ml，在显微镜下拍照保存细胞状态，观察细胞密度。如果细胞密度大于80%，可以按比例传代（第一次传代比例建议为1:2）。如果细胞密度低于70%，可以留下10-12ml继续培养，直到添加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀。DMSO终浓度为10%，细胞密度不小于1x10(6)/ml，每个冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管标签；将冻存管放入程序降温箱，并放入程序降温箱。

2.吸出大部分培养液，留下10-12ml，在显微镜下拍照保存细胞状态，观察细胞密度。如果细胞密度大于80%，可以按比例传代（第一次传代比例建议为1:2）。如果细胞密度低于70%，可以留下10-12ml继续培养，直至达到结果细胞Dexact后4天，Dex(1,2,5μM)组细胞增殖率和Ki67表达水平显着低于Hela组，细胞凋亡率和Caspase-3表达水平显着升高；同时，与Hela组相比，Dex (1,

HeLacellATCCCCL-2人宫颈癌细胞培养操作1）复苏细胞：将装有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中摇匀，快速解冻，加入4mL培养基，混匀。 1000RPM离心4分钟，弃上清，加入1-2mL5)细胞活性=活细胞数/细胞总数×100%。 注：当细胞密度较高时，计数时可调整细胞悬液与试泛蓝的比例，并乘以相应的稀释倍数。 3.当细胞密度达到传代密度且细胞活性90%以上时，即可