pcr出现两条带是怎么回事,大学生pcr实验报告

pcr出现两条带是怎么回事,大学生pcr实验报告

1）确认程序中是否设置信号采集步骤：两步放大程序一般设置在退火延伸阶段进行信号采集；三步放大程序应将信号采集设置在72℃延伸阶段。 2）扩增效率问题：我在做电泳测试realtimePCR时已经失去了心态，运行三轮后，没有阳性对照条带，我都换了，还是没有条带。同一个实验室的其他同学也出现过这种情况。 ，但是还是找不到原因，有谁能提供一些改进的思路吗？ #PCR#研究

1、pcr出现两条带是怎么回事啊

∪＾∪ 这是PCR失败或扩增条带不令人满意且容易扩散的常见原因。 部分批次的引物合成质量有问题，图中两个引物的浓度和一个浓度应该不是引物二聚体。下面两条带看起来像引物二聚体，应该与退火温度或引物特异性关系不大。第二个引物

2、pcr出现两条带是怎么回事儿

PCR条带分析有些批次的引物合成质量有问题，两个引物一个浓度，引物浓度不仅要看OD值，还要注意琼脂糖凝胶电泳的引物原液，必须有引物条带，两条引物条带的亮度要大体一致。2.当细菌在平板上生长时，可以摇动选定的单克隆菌落上来，但是菌液PCR中没有条带？ 3.细菌在平板上生长时，可以将选定的单克隆菌落摇匀，但菌液PCR和阳性对照的大小不对？ 4.当细菌在平板上生长时，可以将选定的单克隆菌落摇匀，但菌液PCR存在很多问题。

3、pcr出现两个条带

扩增产物出现多条带（混合条带）。1）引物用量过大，引物特异性不高。 应更换底漆或减少底漆用量。 2）循环次数很多。 适当增加模板用量，减少循环次数。 3）酶第一次PCR结果（TM：58℃）：没有目标条带，条带不清晰，可能是琼脂糖凝胶有问题，25分钟后标记没有分离，上样量太多，考虑重试。 做；第一个PCR结果图和第二个PCR结果图（TM：58℃）：添加WT样本，

4、pcr出现两条带是阴性吗

PCR扩增中出现非特异性条带的原因有很多，包括：模板DNA污染、引物非特异性结合、PCR反应体系中的质粒等。为什么PCR后的电泳中出现很多条带？ 1.加热温度太低，可以提高退火温度。2.检查PCR体系各浓度的浓度。引物浓度不宜过高，一般为10UM。质粒模板用量一般为1-10ng。过高和过低。